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生化實驗基本操作技術(shù)
發(fā)布時間： 2010-05-05 點擊次數(shù)： 2995次：玻璃儀器的洗滌及干燥：
（一） 意義：去除干擾物，提高實驗結(jié)果的準確性。
（二） 常用洗滌劑：
1． 洗衣粉，肥皂，洗潔精，去污粉----用于一般去污。
2． 強酸，強堿，尿素------去除蛋白質(zhì)，核酸。
3． 鉻酸洗液------見附2。
4． 水（自來水，蒸餾水）------用來沖洗容器。
（三） 洗滌方法：
* 洗滌程序：泡→洗（→泡）→沖→漱
1． 新儀器的洗滌：
2%的鹽酸浸泡數(shù)小時→自來水沖凈→洗滌劑溶液中浸泡過夜→試管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器內(nèi)外壁→自來水沖10 遍→蒸餾水漱洗
內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
2． 非定量敞口儀器的洗滌（試管、燒杯等）用后立即放入洗滌劑溶液或清水中浸泡過夜→試管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器內(nèi)外壁→自來水沖10 遍→檢查是否洗凈→蒸餾水漱洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
注意：檢查毛刷頂部是否裸露，洗刷時用力不可過猛，以免戳破玻璃儀器。
3．窄口儀器的洗滌（容量瓶、試劑瓶）
使用后立即在洗滌劑溶液或清水中浸泡過夜→洗滌劑溶液倒入容器內(nèi)（約1/4）→小心轉(zhuǎn)動或搖動儀器→自來水沖10 遍→檢查是否洗凈→蒸餾水涮洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
4．刻度吸管的洗滌
使用后立即用大量自來水沖洗（切勿使樣品干在管內(nèi)，否則難以洗凈）→干燥后放入鉻酸洗液中浸泡過夜→取出，在特制的容器中用自來水沖洗30 分鐘→蒸餾水涮洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
（四） 判斷洗凈的標準：
洗凈的玻璃儀器管壁光潔、清亮，無污漬；被水濕潤后，管壁呈現(xiàn)均勻水膜，無掛水珠。
（五）干燥方法
1、 晾干：儀器倒立放在特制架子上，自然晾干。
2、 烘干：盡量倒凈儀器內(nèi)部的水，將其倒立放在托盤上，放入烘箱烘干。普通儀器用80-100℃，容量分析儀器用37-40℃。
3、 有機溶劑干燥：體積小的容器急需干燥時，可用此法。洗凈的儀器先用少量酒精洗一次，再用少量丙酮或乙醚洗滌，吹干（不必加熱）。二：吸管和微量移液器的使用及注意事項：
（一） 刻度吸管：
1． 作用：用于準確移取一定體積的溶液。
2． 規(guī)格（ml）：0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0。
3． 注意事項：
1） 使用前：
① 觀察吸管有無破損，污漬。
②觀察吸管的規(guī)格：所用吸管的規(guī)格應等于或近似等于所要吸取的溶液的體積。
③觀察有無“吹”字：若有，說明刻度到，放液后需將的溶液吹出，否則不吹。
2） 握法：拇指和中指夾拄吸管，食指游離。
3） 取液：①垂直入液 ②入液深度適中 ③洗耳球吸取 ④取液高度高于刻度2-3cm ⑤食指按緊吸管
上端⑥刻度吸管提離液面⑦觀察液內(nèi)無氣泡⑧濾紙擦凈管壁。
4） 放液至刻度：①刻度吸管垂直②右眼與刻度線平行③輕輕松開食指（轉(zhuǎn)動刻度吸管），使液面緩慢降低，直至zui低點與刻度線相切。
5） 放液至容器：①刻度吸管垂直②容器傾斜45℃③使溶液自然流入容器，注意吹與不吹。
6） 一根吸管只吸取一種試劑，用后立即浸入水中。
（二） 微量移液器
1、 作用：
用于準確移取一定體積的溶液，尤其是較小體積
的溶液（<100ul）。
2、 規(guī)格：
固定式、可調(diào)式；單道、多道
1，2，10，20，100，200，1000（單位：ul）
3、 注意事項：
1） 使用前：
①連續(xù)按壓數(shù)次，以調(diào)節(jié)空氣。
②調(diào)節(jié)體積至所需的刻度。
③接上Tip 頭，注意密封。
2） 握法：手掌握住器液器，拇指按壓。
3） 取液：①輕壓拇指至*停點 ②垂直握持移液器，使Tip 頭浸入溶液 ③預洗一次 ④緩慢松開按鈕，吸取溶液⑤等一秒鐘，將移液器提離液面，擦去Tip 頭外液滴。
4） 放液：①Tip 頭貼住容器內(nèi)壁 ②平穩(wěn)地把按鈕壓至*停點，等1 秒鐘再壓至第二停點③提起移液器，Tip 頭貼容器壁擦過④松開按鈕。
5） 如吸取不同溶液必需更換Tip 頭。三：電動離心機的使用：
（一） 作用：分離密度不同的物質(zhì)。
（二）分類：低速離心機 <4000rpm
高速離心機 6000-20000rpm
超速離心機 >20000rpm
（三） 使用：
1、 開機：
① 將待離心溶液倒入大小適中的離心管中（溶液量不應超過離心管總體積的2/3）
② 離心管連同管套一起放在粗天平上平衡（管套底部應放置橡皮墊）
③ 對稱放入離心機插孔中（不用的管套應拿出），蓋緊上蓋。
④ 開關(guān)置于“關(guān)”，調(diào)速桿置于zui小（逆時針旋轉(zhuǎn)至轉(zhuǎn)不動，接通電源，打開開關(guān)，緩慢啟動。
⑤ 用調(diào)速桿沿順時針方向緩慢調(diào)速，觀察轉(zhuǎn)速，達到轉(zhuǎn)速后開始計時。
2、 關(guān)機：
① 用調(diào)速桿將沿逆時針方向緩慢降速，關(guān)掉開關(guān)，切斷電源。
② 停轉(zhuǎn)后打開上蓋，輕輕取樣。
③ 離心管套倒立放置，使其干- 上一篇：肺癌中PCNA的研究
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